小鼠溶血性贫血血虚证模型

1.造模材料  

动物：NIH种小鼠，雌雄各半，体重22～26g；药物：乙酰苯肼。

2.造模方法

 (1)取NIH种小鼠，尾取血检测血红蛋白值及红细胞数后，分别腹腔注射不同剂量的苯肼及生理盐水(对照)，各组均按不同检测时间点进行观察，可造成不同程度溶血性贫血模型。昆明小鼠，利用60Co射线辐射法。

 (2)造模开始，正常组和模型组每日对照胃饲自来水，其余各组小鼠每天胃饲中药1次，每次0.5ml，连续给药10天。除正常组外，其余各组小鼠分别于第1天、第4天和第7天皮下注射乙酰苯肼0.18ml/kg体重，正常组于同期皮下注射同量生理盐水对照。 

 3.造模原理  

以一定量乙酰苯肼(APH)给实验动物注射，乙酰苯肼为一强氧化剂，能较专一地对红细胞作缓慢而进行性地氧化损伤作用，尤其是干扰了红细胞内的葡萄糖岳磷酸脱氢酶，促进血红蛋白变性而形成海氏小体，使红细胞崩解，造成溶血性贫血。 

 4.造模后一般变化

造模动物行动迟缓，团缩弓腰，喘促，面、眼、耳、尾苍白而凉，毛蓬竖少光泽，血色暗红。小鼠注射乙酰苯肼后，红细胞和血红蛋白量明显下降，小、鼠黏膜苍白，毛发无光泽，乏力，反应迟钝，尾、肢发冷。 

 5.造模后生化变化 

 (1)对血虚动物血细胞比容及血红蛋白的影响：生理盐水组的血红蛋白(mmoL/L)、血细胞比容(％)分别为2.5±0.32、57.85±4.67；模型组分别为1.43±0.31、40.02±4.53。乙酰苯肼组动物的血红蛋白、血细胞比容均明显低于生理盐水组，说明溶血性血虚证模型造成。

 (2)小鼠溶血性贫血模型中苯肼对小鼠血红蛋白的影响：苯肼120mg/kg组：腹腔注射苯肼后24h、3天、5天及6天Hb(g/L)分别下降158.1±15.9(-18.83％)、113.1±12.3(-57.88％)、53.44±27.8(-27.55％)及31.8±21.8(-16.37％)与试验前及生理盐水组比较有显著意义。苯肼90mg/kg组：注射苯肼后24h、3天、5天Hb分别下降159.3±5.8(-78.86％)、95.2±23.0(-46.67％)及13.7±16.8(-6.94％)，与试验前及生理盐水组比较，差别非常显著。

 (3)苯肼对小鼠红细胞数的影响：注射苯肼120mg/kg剂量的24h，红细胞数均值下降了(3.7±2.4)×10的12次方/L(-57.33％)，注射后3天，均值下降了(2.5±3.6)×10的12次方/L(-40.79％)。注射后5天，下降了(1.8±1.3)×10的12次方/L(-29.48％)。苯肼90mg/kg组：注射苯肼后24h即3天分别下降了(31.9±1.7)×10的12次方/L(-34.50％)及(2.1±2.1)×10的12次方/L(-32.63％)，注射5天后下降了(1.3±1.4)×10的12次方/L(-20.65％)，与对照组比均有显著性差异。

 6.注意事项  

乙酰苯肼用量可通过实验摸索。动物的不同品种、来源需要量可略有不同。乙酰苯肼的用量尚可探索，不同的动物可能有异，如模型程度太严重可能掩盖了药物作用；肝素管不要失效。